FastPure Plant Total RNA Isolation Kit (Polysaccharides& Polyphenolics –rich)
两个流程,让你的多糖多酚植物RNA提取少走弯路
多糖多酚植物总RNA快速提取;产物可用于RT-PCR;荧光定量PCR;芯片分析;Northern Blot;Dot Blot;Ploy(A)筛选;体外翻译;RNase保护分析;分子克隆
- 安全:无需使用酚氯仿等有机试剂
- 快速:30min内即可完成样本RNA提取
- 兼容性广:适用于多种多糖多酚类植物样本与非多糖多酚类植物样本的提取
- 基因组残留少:配有基因组吸附柱,可有效去除DNA污染
1.产量高、纯度高
分别使用Vazyme #RC401与T公司相关产品提取松针、月季花、水稻叶片的RNA。通过Onedrop分别对Vazyme #RC401与T公司提取的不同植物样本的RNA进行测定,可以看出Vazyme #RC401与T公司提取RNA的OD260/280比值接近,均为2.0左右,但T公司OD260/230比值明显超出正常范围,说明使用Vazyme #RC401提取的植物RNA纯度明显高于T公司相关产品。
2.完整性高
分别使用Vazyme #RC401与T公司相关产品提取50mg香蕉果实、土豆块茎、月季花瓣、水稻叶片的RNA,并进行1%琼脂糖凝胶电泳。从图中可以看出,Vazyme #RC401提取不同组织的RNA产量高,完整性好。
M:DL2000 Plus DNA Marker(Vazyme #MD101)。洗脱体积100 μl,上样量4 - 10 μl。
使用Vazyme #RC401分别提取50mg(香蕉果实、土豆块茎、月季花瓣、松针、芦苇叶片、鹅掌楸叶片、棉根、大豆叶片、水稻叶片),20mg(荞麦种子)的RNA,并进行1%琼脂糖凝胶电泳。从图中可以看出,Vazyme #RC401样本兼容性好,对于多糖多酚与非多糖多酚的植物样本,Vazyme #RC401提取RNA 完整度好,产量高。
M:DL2000 Plus DNA Marker(Vazyme #MD101)。洗脱体积100μl,上样量4-10 μl。
本试剂盒基于硅胶柱纯化技术,无需使用有毒的酚氯仿抽提,仅需30 min即可从植物组织,特别是富含多糖多酚植物组织(如棉花叶片、松针、香蕉、马铃薯块茎、葡萄、月季花、荞麦等)中快速提取多个样本的总RNA。试剂盒中FastPure gDNA-Filter ColumnⅡ 能够有效过滤杂质并特异性吸附去除基因组DNA。而FastPure RNA Column Ⅳ 能高效的结合RNA,配以优化后的Buffer溶液,使得到的总RNA纯度高,无蛋白和其他杂质污染,可用于RT-PCR Real-time PCR、芯片分析、Northern Blot等多种下游实验。
室温(15 - 25℃)保存,常温运输。
Q1:RC401中包含两次过柱,目的分别是什么
A1:第一次过柱目的:将DNA与RNA同时吸附到吸附柱上,去除多糖多酚;
第二次过柱目的:将RNA特异性吸附,去除DNA。
Q2:提取不到RNA或者RNA产量低
A2:(1) 样本破碎裂解不充分。液氮研磨时,确保研磨充分,并迅速转移至预先准备好的裂解液中;
(2) 起始投入量过高或过低。样本起始投入量建议按照说明书进行操作;
(3) 洗脱不充分。可以加入70-90℃预热的RNase-free ddH2O,延长放置时间;
(4) RNA降解。样本保存不当或者反复冻融,提取过程或者电泳过程存在RNase污染。
Q3:提取的RNA有基因组DNA污染
A3:(1) 样本投入量过多。减少样本起始投入量;
(2) 逆转录时选择含有基因组去除模块的逆转录试剂;
(3) 设计引物时选用垮内含子的引物,从而避免基因组DNA模板参与扩增反应;
(4) 用Dnase I进行膜上消化清除DNA污染。
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