FastPure Gel DNA Extraction Mini Kit
无需柱平衡,一盒两用的纯化试剂
胶回收/DNA纯化;产物可用于连接转化;酶切产物回收;体外转录;PCR;测序;显微注射
· 简单快速:只需加入1倍体积溶胶液,无需柱平衡,操作简单快速,10 min-15 min即可完成纯化工作
· 一盒两用:不仅可用于DNA凝胶回收, 也可用于DNA 粗品纯化
· 回收效率高:回收效率可高达80%
· 回收DNA片段范围广:适用于70 bp-20 kb的DNA 片段回收
分别对50 bp、486 bp、1 kb、2 kb、4.5 kb、7.5 kb、10 kb、12 kb的PCR产物进行纯化,将纯化前后的片段同时进行琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示本试剂盒在50 bp-12 kb片段范围均具有较好的回收效果。
M:1 kb DNA Ladder (Vazyme #MD105)
分别使用Vazyme、Q公司、T公司、A公司胶回收试剂盒对5.4 kb片段进行切胶回收,将回收产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示基因组DNA回收效率Vazyme远高于Q、T和A公司。
M:DL15000 DNA Marker (Vazyme #MD103)
本产品采用优化的缓冲体系及硅胶柱纯化技术,仅需10 - 15 min即可从各种浓度的TAE或TBE琼脂糖凝胶中回收70 bp - 20 kb的DNA片段,DNA回收效率高达80%。此外,本产品仍可对PCR产物、酶促反应体系或其它各种方法获得的DNA粗制品中DNA片段进行纯化,同时去除蛋白质、有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。纯化产物可直接用于连接、转化、酶切、体外转录、PCR、测序、微注射等分子生物学研究。
室温(15-25℃)保存。
Q1:DNA回收率低
A1:(1) 琼脂糖凝胶未完全溶化:尽可能去除不含目的片段的琼脂糖,溶胶过程间隔性的摇晃促进凝胶充分溶化,仔细检查确保无固体琼脂糖残留;
(2) 回收片段过小:若回收小于或等于100 bp DNA片段时,在溶胶时加入3倍体积Buffer GDP,水浴溶胶后,再加入1倍凝胶体积异丙醇,混匀后再按后续挂柱步骤进行操作;
(3) 试剂准备有误:Buffer GW需加入乙醇稀释或乙醇体积不准确(乙醇浓度需控制在80%);
(4) 洗脱效率低:将Elution Buffer预热至55℃,并重复二次洗脱。
Q2:DC301样品兼容范围
A2:70bp-20kb。
Q3:胶回收试剂盒是否可以回收PAGE胶产物
A3:不可以。
Q4:DC301试剂盒中的纯化柱可兼容DNA的量
A4:可兼容35μg。
Q5:DC301说明书中的第4步的作用是什么?
A5:有两个作用:
- 为了防止上一步有胶没有彻底溶解,即存在小颗粒;
- 调节上柱环境,让DNA挂的更牢固。
Q6:Elution Buffer里含有EDTA吗?会对后续重组有影响吗
A6:不含EDTA,不影响重组。
Q7:DC301加入buffer GDP后溶液由黄色变成橙色是什么原因,会产生什么影响
A7:是pH发生变化导致的,会影响回收率,可能是胶条重量和Buffer GDP不是1:1导致的,建议将胶条进行称重,1:1添加Buffer GDP。
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